Q. 菌液保存法を具体的に

水とグリセロールを１対１で混合し、50%グリセロールを作ります。100%だと粘度が高すぎて扱いにくいからです。50%グリセロールは、オートクレーブ滅菌して室温保存しておけます。適宜滅菌的に取り出して、菌液と混合します。菌液100に対して60加えれば十分です。混ざりにくく、きちんと混ぜないと凍結後菌を起こせなくなるので、十分ピペッティングで混合してから凍結します。

Q. ハイブリ液は１回きりか？

RDAマーカーの入ったハイブリ液は、保存、再使用が可能です。遮光下マイナス20℃で凍結保存し、再使用時には5分ボイルしてDNAを１本鎖にして、他にプローブを含まないハイブリ液でプレハイしたメンブランを浸けて同様にハイブリします。２年前のハイブリ液再使用でも問題ありませんでした。

Back

Carcinogenesis Division National Cancer Center Research Institute 5-1-1 Tsukiji Chuo-ku, Tokyo 104-0045, Japan Send mail to: tushijim@gan2.ncc.go.jp